术中快速冰冻:患者还躺在手术室 医生在等些什么?

2020年07月14日 10:14 简体 正体   评论»

术中快速,也称术中冰冻,是室与病理科的冰雪奇缘。

术中快速

有啥用?

同一个器官的不同疾病,即使都要进行手术,手术的范围也是不一样的。只有当确诊为癌症时,才能实施相应的“癌症手术”。

之前我们曾经讲过,癌症确诊需要病理检查,也就是在肿瘤上取一点样本,放在下观察。

为了取这些样本,们想了各种办法,既要将身体损害降到最低,又要将医疗器械探入体内取样。我们熟悉的胃镜就是其中之一。

胃镜概念图

但是……

不是所有病变都能通过内镜、穿刺这样的手段取出来检查。这时候怎么才能确定是不是要进行“癌症手术”呢?

我们还曾经讲过,手术室切下来的病变,也会送到病理科进行病理检查。其中有一项检查内容,就是病变到底有没有“切干净”

但是……

手术都做完了,就算知道“没切干净”,岂不是只能亡羊补牢了?为什么不能手术期间就检查一下切缘呢?

术中快速冰冻,就是解决这些问题的一项检查。听名字就知道,它的特点就是“快”。

有多快呢?通常可以在30分钟内给出检查结果。

有了这项技术,手术前无法确定手术范围的患者,可以先进行手术,在手术室取出样本送到病理科,在手术室等待30分钟得到结果后,当场决定手术范围。

需要在手术中确定是否切干净的患者,也可以在手术间等待30分钟,假如真的没有“切干净”,还可以继续手术扩大切除范围。

可以说这30分钟,是世界上最漫长的30分钟了。在这30分钟内具体发生了些什么呢?

电视剧里术中快速冰冻检查的过程(来自日剧《Fragile》)

是不是看花眼了?我们来分解步骤。

术中快速

咋弄的?

手术室切下的人体组织送到病理科,依然需要先“取材”。为了保证速度,通常一处检查部位只取1~2块标本。

既然叫术中快速冰冻,那除了“”,就是“”了。

以前我们也讲过,想把人体组织切成几微米厚的薄片,直接切软趴趴的肉是不行的。

就算切涮羊肉片,也得先冻一冻再切不是?

也不知道是不是受了中国涮羊肉的启发,总之呢,一百多年前,西洋人发明了用于病理检查的冰冻切片技术

冰冻切片和石蜡切片一样,要想切,先得制成“块”。

切羊肉片也要先制成“羊肉块”。

不管是石蜡切片还是冰冻切片,“制成块”这个步骤,主要靠的就是“包埋”。

石蜡切片是用石蜡制成“蜡块”,冰冻切片是用水制“冰块”吗?

还真不是。冰冻切片反而不能碰水,水在冷冻时形成的冰晶,会十分影响切片的质量,对细胞和组织的形态产生破坏,极大地干扰病理医师的

真要说起来,冰冻切片的“冰块”,外形有点像“雪糕”。再说了,“雪糕”也应该比“冰块”好切啊!

冰冻切片所用的包埋剂,通常使用OCT包埋剂,是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,长得有点像胶水。特点就是好冻,好切,溶于水

这种胶水可不便宜。

上图就是OCT包埋剂涂到组织托盘表面,放入冰冻切片机后,迅速冷冻的过程。

速度快得像被爱莎施了魔法。

要问切片机里温度是有多低,这可是门学问,不同组织需要的温度是不一样的。不过大致倒也没多低,反正不如东北最冷的时候冷(最多打个平手?)。

如果直接在冰冻切片机里涂这种“胶水”,效果是酱婶儿的:这里涂完以后还放上了需要制片的组织

速冻完成以后,就要切片和贴片了。贴片就是把切好的薄薄一层组织,贴到玻璃片(载玻片)上。

这需要经验丰富的病理技术员完成。

具体是怎么做的?憋说话,看图:切片和贴片

贴好的切片需要立刻放入固定液里固定,时间通常不超过1分钟。

这时,载玻片上的组织切片几乎是透明的,想在显微镜下看清楚,需要染上色。染色方法与常规石蜡切片大致上相同,都是HE染色。

染色完成后,滴加树脂胶用盖玻片覆盖,就是呈现在病理医师面前的冰冻切片了。

听起来很复杂,实际上这个过程只需要10分钟左右的时间。

术中快速

万能吗?

有了这么酷的技术,我们还要石蜡切片干啥?都去做冰冻好了呀!

很遗憾,并不能。术中冰冻仅仅是一个粗略的判断,远远无法代替慢工出细活的石蜡切片。

前面我们提到过,为了保证速度,一处检查部位通常只取1~2块标本制片。但是很多肿瘤有一种叫做“异质性”的特点。说白了就是同一块肿瘤,不同的区域长得还有可能不一样。

当然了,除了有可能长得不一样,还有很多其它不一样的地方,我们在这先不做讨论。

那么问题来了,医生只能尽量选择从外表看起来最具有代表性的区域进行制片,但仍然有时取不到最典型的区域。

那我不图你30分钟出结果,我等俩小时,你多取一些,我慢慢等总可以了?总比石蜡切片等好几天强啊!

很遗憾,冰冻切片的制作方式较为简略,还会导致镜下形态存在一些假象。术中快速冰冻的诊断,也需要更高素质的病理医师。

我们前面说过,水在冷冻时形成的冰晶会影响诊断,所以不能用水进行包埋。但是有些人体组织本身就含有大量水分,在进行冰冻切片诊断时就会受到限制。

冰晶形成

冰冻切片还可能会造成组织过度收缩,给诊断造成困难。冰冻处理后的细胞会出现体积胀大、拉长、细胞内空泡等变化,细胞核也会产生一定的变形。

还有很多疑难病例,即使是石蜡切片都极难确切诊断,仅凭冰冻切片更无法诊断明确。况且我们之前介绍的免疫组化技术,尚未广泛应用于冰冻切片。

国内外报道的术中冰冻诊断准确率在97%左右,是存在一定风险的,而且不能完全避免。

还有一点就是,由于成本较高,冰冻切片较常规石蜡切片的单价更昂贵,对于需要制作大量切片的恶性肿瘤患者来说,会造成更大的

权衡利弊

怎么办?

术中快速冰冻的局限无法避免,然而对于一些患者手术范围的选择起到决定性作用。

于是对于需要做术中冰冻诊断的患者,通常采取这样的方式:

对于送检的快速冰冻标本,医生取所需检查的1~2块组织进行冰冻切片

另取更多的病变组织,制作蜡块进行石蜡切片

对于冰冻后的那1~2块组织,切片诊断后也会制作成蜡块,其切片称为“冰冻剩余”切片

手术中,病理医师对冰冻切片进行大致诊断,手术医生根据这个诊断做出手术方案的选择。

手术后,用几天时间对石蜡切片和冰冻剩余切片进行细致观察,复核术中诊断,并且做出更细致的诊断。

快速冰冻往往止步于判断手术方式,而这个更细致的诊断往往可以得到更多的信息,比如判断患者的预后,指导术后的等等。

还有一些通过冰冻切片无法做出诊断的病例,更要等待术后的石蜡切片才能决定下一步是否还需要二次手术。虽然二次手术会造成一定的负面影响,但是术中冰冻也并非万能,这一点是一定要清楚的。

总结起来就是这样:好了,以上就是关于术中快速冰冻诊断技术的全部介绍。

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来源:肿瘤时间

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